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細胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅
 

貨號   規(guī)格      備注
T1300  100ml       不含酚紅
T1320  100ml       含酚紅

產品說明 ：
    在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養(yǎng)中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA 等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，使組織或貼壁細胞分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。
    索萊寶生產的胰蛋白酶-EDTA 消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM），溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。本產品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細胞狀態(tài)好等特點。通常室溫消化 2 分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚紅和不含酚紅 2 類產品，酚紅具有 pH 指示作用。
    保存：-20℃保存，有效期 12 個月。

使用方法 ：
1. 貼壁細胞的消化：
     a) 吸去培養(yǎng)液，用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
     b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液，蓋過細胞即可，室溫放置 1-2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
     c) 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
     d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。
     e) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化：
    不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
 

相關文獻：

《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699

注意事項 ：
    1．由于組織或細胞性質不同，實驗人員應依據(jù)具體情況，確定消化時間；消化細胞時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁和生長狀況；
    2．本產品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被微生物污染；
    3．不宜 4℃長期保存，切忌反復凍融，小量使用時建議分裝凍存；
    4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

細胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅。