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滿滿的干貨(一):質(zhì)粒DNA的提取,濃度會(huì)分析了嗎?

更新時(shí)間:2025-08-12點(diǎn)擊次數(shù):78

本期主題 什么是吸光值?

A260、A280和A230是紫外分光光度計(jì)在核酸濃度和純度檢測(cè)中常用的波長(zhǎng)。通過(guò)這些波長(zhǎng)的吸光值,可以計(jì)算出A260/A280和A260/A230比值,用于評(píng)估DNA或RNA的純度。在質(zhì)粒DNA提取中,比值異常通常反映樣本被特定雜質(zhì)污染。

下面先對(duì)質(zhì)粒DNA濃度各數(shù)值代表的含義進(jìn)行下詳細(xì)的介紹。

一、各吸光值含義

二、理想的比值范圍

對(duì)于更精確的定量,建議使用Qubit熒光定量或RiboGreen定量方法。

三、質(zhì)粒DNA比值異常原因分析

因此,對(duì)于質(zhì)粒DNA而言,吸光值超出正常范圍時(shí),實(shí)際濃度便會(huì)有不準(zhǔn)確性,建議若有電泳結(jié)果,需要將NanoDrop測(cè)定的比值結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳的亮度一起判斷質(zhì)粒質(zhì)量。

四、濃度虛高或偏低

● 質(zhì)粒構(gòu)型(如超螺旋、線性、開(kāi)環(huán))不同,在瓊脂糖凝膠上的遷移速度不同,導(dǎo)致亮度與實(shí)際濃度不符。

● RNA殘留(未充分降解的小RNA片段)污染,殘留的RNA會(huì)在電泳上最下面看到有亮帶殘留,干擾對(duì)質(zhì)粒濃度的判斷。

● 蛋白質(zhì)或酚類物質(zhì)污染,紫外分光光度計(jì)測(cè)得的A260值偏高,導(dǎo)致質(zhì)粒濃度虛高。

● 斷裂的DNA片段,導(dǎo)致電泳亮度降低,但濃度測(cè)定仍顯示較高值。

五、索萊寶質(zhì)粒提取試劑盒:

提取純化質(zhì)粒DNA的得力助手,真實(shí)!

質(zhì)粒是一種小型、環(huán)狀的DNA分子,存在于細(xì)菌等微生物中。它們獨(dú)立于細(xì)菌的染色體DNA存在,能夠自主復(fù)制,并且可以攜帶各種基因。它們是科學(xué)家們手中的“基因載體",能夠幫助我們實(shí)現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移、表達(dá)和調(diào)控。在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,質(zhì)粒提取是一項(xiàng)基礎(chǔ)且關(guān)鍵的操作。一個(gè)優(yōu)質(zhì)的質(zhì)粒提取試劑盒,能夠幫助科研人員快速、高效地獲取高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。

主要的應(yīng)用領(lǐng)域


基因克隆獲取大量目標(biāo)基因;基因庫(kù)構(gòu)建;基因序列分析

基因表達(dá):蛋白質(zhì)生產(chǎn);功能研究

遺傳工程:基因編輯;基因治療;轉(zhuǎn)基因生物

基因調(diào)控研究:啟動(dòng)子分析;轉(zhuǎn)錄因子研究;信號(hào)通路研究

生物制藥:藥物開(kāi)發(fā);疫苗制備;基因治療藥物

教育和科研工具:教學(xué)實(shí)驗(yàn);科研工具


顯著優(yōu)勢(shì)


操作簡(jiǎn)便,省時(shí)高效,安全環(huán)保

流程標(biāo)準(zhǔn)化:無(wú)需有毒試劑,避免傳統(tǒng)方法中苯-酚、氯-仿等危險(xiǎn)化學(xué)品的使用,只需離心即可完成。

快速提取:通常30-60分鐘即可獲得高純度質(zhì)粒DNA,適合高通量實(shí)驗(yàn)需求。


高純度、高得率

采用柱式純化技術(shù),結(jié)合裂解和吸附配方,有效去除雜質(zhì)(如RNA、蛋白質(zhì)、基因組DNA)。

A260/A280=1.8-2.0,A260/A230=2.0-2.5,確保質(zhì)粒提取的高濃度。


兼容性強(qiáng),適用范圍廣

適用于多種大腸桿菌菌株,如DH5α等,對(duì)不同質(zhì)粒均可輕松提取。

不同規(guī)模需求:從微量(1-5mL)到大量(100mL)培養(yǎng)物均可匹配。

下游應(yīng)用廣:可直接用于PCR、酶切、轉(zhuǎn)化等高靈敏度實(shí)驗(yàn)。


靈活選擇(不同級(jí)別試劑盒)

普通級(jí):常規(guī)克隆、篩選

去內(nèi)毒素級(jí):細(xì)胞轉(zhuǎn)染、基因治療


索萊寶質(zhì)粒提取試劑盒產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

D1100

質(zhì)粒小量提取試劑盒

D1110

質(zhì)粒大量提取試劑盒

D1120

革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒

D1130

革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒

D1140

去內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒

D1150

去內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒

D1160

酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒

DM1100

質(zhì)粒小量提取試劑盒(磁珠法)


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